INSTITUTO DE QUÍMICA E BIOTECNOLOGIA PROGRAMA DE PÓS- GRADUAÇÃO EM QUÍMICA E BIOTECNOLOGIA

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1 UFAL

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INSTITUTO DE QUÍMICA E BIOTECNOLOGIA PROGRAMA DE PÓS - GRADUAđấO EM QUễMICA E BIOTECNOLOGIA PURIFICAđấO PARCIAL DE COLINESTERASE DE PROCHILODUS BREVIS PARA EMPREGO BIOTECNOLÓGICO

UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALAGOAS UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALAGOAS

  Abasorbância a 280nm (●—●) e atividade AChE (■—■)............................................62 Figura 27 - Perfil de eluição para a cromatografia de AChE de Prochilodus Brevis em Sephacryl S-200 (1,0x22 cm) previamente equilibrado com 20mM de Tris-HCl, pH 7,5 e NaCl 0,3M com uma taxa de fluxo de 0,40 mL/min e 3,0 mL por fração. Abasorbância a280nm (●—●) e atividade AChE (■—■)......................................................................68 Figura 29 - Perfil de eluição para a cromatografia de AChE de Prochilodus Brevis em Sephacryl S-100 (1,5x16,19 cm) previamente equilibrado com 20mM de Tris-HCl, pH7,5 com uma taxa de fluxo de 0,4 mL/min e 3 mL por fração.

A coluna cromatográfica foi empacotada com a resina DEAE-Sepharose e lavada com 3 volumes de coluna de água deionizada (18 MΩ cm). Equilibrou-se com

  3 volumes de coluna de Tampão A (Tris-HCl 20mM em Triton x100 (0,1%)) a uma taxa de fluxo de 0,4 mL/min. Carregou-se a coluna com 5 mL (8,84% do volume daresina; Vresina = 56,52mL) de amostra dialisada de 0-40%, previamente filtrada em filtro milipore 0,45µm.

A coluna cromatográfica foi empacotada com a resina sephacryl S-100 e lavada com 3 volumes de coluna de água deionizada (18 MΩ cm). Equilibrou-se com

  Fonte: autor, 2016 Tabela 3 mostra as propriedades de atividade do extrato livre de células após as etapas de purificação frente a ATCh, com atividade específica final de 0,128 U/mg, fator de purificação de 0,41 e recuperação de 0,45%. O limite de detecção (LD) e o 5.8 Modelo computacionalAfim de compreender melhor o uso de NTCPM como meio de imobilização de ChE por interações adosortivas, foram feitos estudos computacionais combinando simulações de dinâmica molecula com docking molecular, pois tem sido amplamenteempregado como método de estudo das interações ligante-alvo (AJLOO et al., 2007, 2008, 2013, 2015).

Cα-RMSD e o movimento das cadeias laterais foram plotados para a avaliar a

  A estabilização das estruturas laterais e carbonos-alfa durante o período de 8 a 10 ns é o tempo adequado para se obter a estrutura nativa de HuBuChE, para seguircom o experimento de docagem. O.; Caracterização e estudos de inibição de acetilcolinesterase e butirilcolinesterase no cérebro dos peixes curimatã (Prochilodus Brevis) e Pirambeba(Serrasalmus brandti), Monografia (Trabalho de conclusão de curso), Química bacharelado, Instituto de Química e Biotecnologia, 2014.

Computational Chemistry, v. 31, n. 2, p. 455 –461, 2010

  Fish bioaccumulation and biomarkers in environmental risk assessment: a review. Sistema colinérgico: revisitando receptores, regulação e a relação com a doença de Alzheimer, esquizofrenia, epilepsia etabagismo.

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