DETECÇÃO DO MYCOPLASMA SUIS EM GRANJAS COM TRANSTORNOS REPRODUTIVOS

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UNIVERSIDADE DO ESTADO DE SANTA CATARINA – UDESC CENTRO DE CIÊNCIAS AGROVETERINÁRIAS – CAV MESTRADO EM CIÊNCIA ANIMAL LUIZ CARLOS BORDIN DETECđấO DO MYCOPLASMA SUIS EM GRANJAS COM TRANSTORNOS REPRODUTIVOS

  "Ser normal é meta dos fracassados." RESUMO A Eperitrozoonose Suína (ES), causada pelo Mycoplasma suis, é uma doença infecciosa das hemácias e que causa uma série de transtornos, desde reprodutivos,como o nascimento de leitões fracos e natimortos, e produtivos, como a ocorrência de doença clínica, queda de desempenho, aumento na conversão alimentar eimunossupressão. O objetivo dopresente trabalho foi realizar estudo da ocorrência da ES em granjas com transtornos reprodutivos com o uso das técnicas de PCR com controle interno (CIA)e de PCR quantitativo em Tempo Real.

CAPÍTULO II – ARTIGO .......................................................................................... 25 OCORRÊNCIA DA EPERITROZONOSE SUÍNA EM GRANJAS COM

  A modernaprodução de suínos baseia-se na utilização de avançados métodos de manejo que estabelecem conforto e bem estar animal, em práticas reprodutivas que maximizama produtividade da fêmea, na utilização de linhagens genéticas com comprovada capacidade de transformar grãos em carne e um rígido controle da saúde dosrebanhos. Medidas que eliminem a possibilidade de transmissão, como o controle de insetos e piolhos e durante o manejo impedindo ocontato de sangue infectado como no uso de agulhas, lâminas de castração e corte de dentes são imprescindíveis como profilaxia da ES (THACKER, 2006).

CAPÍTULO II – ARTIGO

  suis em sangue de porcas e tecidos de leitões oriundos de granjas com transtornos reprodutivos,utilizando como ferramenta a PCR convencional (PCR) e a PCR quantitativa (qPCR). A extração foi feita com fenol (Invitrogen™), clorofórmio (Sigma®) e álcool isoamílico (Vetec®), nas (ANEXO) a um volume final de 10% da solução e 1 mL de etanol absoluto gelado (-20°C), permanecendo em freezer a -70°C por quatro horas ou a -20°C por 16 horas, para precipitar o DNA.

DH5α competentes e foram transformadas para as clonagens com pCR®2.1-TOPO® 3,9 kb da após terem sido

  As quantidades de reagentes foram sendo testadas variando as quantidades de magnésio 50mM (1,0; 2,0 e A solução ficou definida com 1,00 µL de Magnésio 50 mM, 1 µL de dNTP,0,75 µL de cada primer (Tabela 1) forward e reverse (10 pmol) e 0,30 µL da enzimaTaq polimerase (5 U/µL) e 0,5 µL de Controle Interno. 2  A técnica da qPCR foi padronizada e foi eficiente em detectar até 3,28x10 moléculas/µL, sendo a qPCR 100.000 vezes mais sensível que a PCR . 14 amostras de sangue de porcas de 80 (17,5%), de 11 granjas diferentes (40,75%), foram positivas por qPCR, com carga bacteriana variando de 2 5 1,32x10 a 2,61x10 moléculas/µL.

In: New York Academy of Sciences. Annals … New York, v. 1081, 2006

CAPÍTULO III – PERSPECTIVAS

  O estabelecimento de métodos confiáveis de diagnóstico e o estudo da patogenia eepidemiologia parecem ser uma necessidade para universidades e centros de pesquisa, a fim de juntos conduzirem estudos sobre ferramentas que disponibilizemestas respostas. Aincapacidade do crescimento “in vitro” do agente nos mostra a necessidade de estudarmos a repetibilidade da doença em estudos de infecção experimental paraserem estabelecidos o conhecimento genético deste micoplasma, os métodos de tratamento clínico e controle.

ZIMMERMAN, J. J.; D’ALLAIRE, S.; TAYLOR, D. J. Diseases of Swine 9 Ames: Blackwell Publishing, 2006

  Exploratory study of Mycoplasma suis (Eperythrozoon suis) on four commercial pig farms insouthern Brazilian Journal of Veterinary Research, Rio de Janeiro, v.13, p. Development of a diagnostic PCR assay based on novel DNA sequences for the detection of Mycoplasma suis (Eperythrozoon suis)in porcine blood.

Durban, Proceedings …Durban: 2008

  In: Clínica e Patologia Suína. Prevalência de rinite atropica e pneumonia em granjas associadas a sistemas de integração de suinos, no Estadode Santa Catarina.

D’ALLAIRE, S.; TAYLOR, D. J. Diseases of Swine 9 Publishing, 2006

  Erytrhrocite membrane alterations associated with the atachmente and replication of Eperythrozoon suis: a light and electronmicroscopic study. Establishment of an efficient enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of Eperythrozoon suisantibody in swine.

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