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Characterization of a novel plasmid type and various genetic contexts of bla OXA-58 in Acinetobacter spp. from multiple cities in China.

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Characterization of a Novel Plasmid Type and Various Genetic Contexts of blaOXA-58 in Acinetobacter spp. from Multiple Cities in China Yiqi Fu1., Jingjin Jiang2., Hua Zhou1, Yan Jiang3, Ying Fu3, Yunsong Yu3*, Jianying Zhou1* 1 Department of Respiratory Diseases, The First Affiliated Hospital, College of Medicine, Zhejiang University, Hangzhou, China, 2 Department of VIP, The First Affiliated Hospital, College of Medicine, Zhejiang University, Hangzhou, China, 3 Department of Infectious Diseases, Sir Run Run Shaw Hospital, College of Medicine, Zhejiang University, Hangzhou, China Abstract Background/Objective: Several studies have described the epidemiological distribution of blaOXA-58-harboring Acinetobacter baumannii in China. However, there is limited data concerning the replicon types of blaOXA-58-carrying plasmids and the genetic context surrounding blaOXA-58 in Acinetobacter spp. in China. Methodology/Principal Findings: Twelve non-duplicated blaOXA-58-harboring Acinetobacter spp. isolates were collected from six hospitals in five different cities between 2005 and 2010. The molecular epidemiology of the isolates was carried out using PFGE and multilocus sequence typing. Carbapenemase-encoding genes and plasmid replicase genes were identified by PCR. The genetic location of blaOXA-58 was analyzed using S1-nuclease method. Plasmid conjugation and electrotransformation were performed to evaluate the transferability of blaOXA-58-harboring plasmids. The genetic structure surrounding blaOXA-58 was determined by cloning experiments. The twelve isolates included two Acinetobacter pittii isolates (belong to one pulsotype), three Acinetobacter nosocomialis isolates (belong to two pulsotypes) and seven Acinetobacter baumannii isolates (belong to two pulsotypes/sequence types). A. baumannii ST91 was found to be a potential multidrug resistant risk clone carrying both blaOXA-58 and blaOXA-23. blaOXA-58 located on plasmids varied from ca. 52 kb to ca. 143 kb. All plasmids can be electrotransformed to A. baumannii recipient, but were untypeable by the current replicon typing scheme. A novel plasmid replicase named repAci10 was identified in blaOXA-58-harboring plasmids of two A. pittii isolates, three A. nosocomialis isolates and two A. baumannii isolates. Four kinds of genetic contexts of blaOXA-58 were identified. The transformants of plasmids with structure of IS6 family insertion sequence (ISOur1, IS1008 or IS15)-DISAba3-like elementblaOXA-58 displayed carbapenem nonsusceptible, while others with structure of intact ISAba3-like element-blaOXA-58 were carbapenem susceptible. Conclusion: The study revealed the unique features of blaOXA-58-carrying plasmids in Acinetobacter spp. in China, which were different from that of Acinetobacter spp. found in European countries. The diversity of the genetic contexts of blaOXA-58 contributed to various antibiotics resistance profiles. Citation: Fu Y, Jiang J, Zhou H, Jiang Y, Fu Y, et al. (2014) Characterization of a Novel Plasmid Type and Various Genetic Contexts of blaOXA-58 in Acinetobacter spp. from Multiple Cities in China. PLoS ONE 9(1): e84680. doi:10.1371/journal.pone.0084680 Editor: J. Ross Fitzgerald, University of Edinburgh, United Kingdom Received August 19, 2013; Accepted November 18, 2013; Published January 6, 2014 Copyright: ß 2014 Fu et al. This is an open-access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License, which permits unrestricted use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original author and source are credited. Funding: This work was funded by research grants from National Natural Science Foundation of China (nos. 81230039 and 81000757) and Science Technology Department of Zhejiang Province (no. 2008C13029-1). The funders had no role in study design, data collection and analysis, decision to publish, or preparation of the manuscript. Competing Interests: The authors have declared that no competing interests exist. * E-mail: zjyhz@zju.edu.cn (JZ); yvys119@163.com (YY) . These authors contributed equally to this work. the horizontal transmission of carbapenemase genes [1,3]. Carbapenem-hydrolyzing class D b-lactamases (CHDLs) are the most concerning carbapenem resistant determinants in Acinetobacter spp [1]. OXA-58 is a widely spread CHDL that has been reported in Acinetobacter spp. from Europe [4], Argentina [5], Australia [6], the United States [7] and many Asian countries [8]. Though OXA-58 shows only low carbapenem-hydrolyzing activity in vitro, the insertion sequence upstream of blaOXA-58 enhances its transcription greatly and mediates resistance to carbapenems [9– 11]. blaOXA-58 exists not only in A. baumannii, but also in A. pittii [12], A. nosocomialis [11], Acinetobacter radioresistens [13], Acinetobacter junii Introduction Members of the genus Acinetobacter are significant nosocomial pathogens. Acinetobacter baumannii and its two close relatives, Acinetobacter pittii and Acinetobacter nosocomialis account for the majority of Acinetobacter infections [1]. A number of reports have detailed the significant increase in resistance of Acinetobacter spp. to conventional antibiotics, including carbapenems, the main therapeutic alternative against multidrug resistant Acinetobacter infections [2]. The worldwide emergence of carbapenem resistant Acinetobacter may be attributed to the spread of some risk resistant clones and PLOS ONE | www.plosone.org 1 January 2014 | Volume 9 | Issue 1 | e84680 OXA-58-Producing Acinetobacter spp. in China [6], and Acinetobacter phenon 6/ct13TU [14]. blaOXA-58 is usually plasmid-borne, which may explain its wide dissemination. It has been reported that OXA-58 producing A. baumannii from European countries are associated with carriage of plasmid replicase gene repAci1 [15]. However, little is known about the replicon types of blaOXA-58-carrying plasmids in A. baumannii and non-baumannii Acinetobacter spp. outside of Europe. blaOXA-58 is the second most frequently identified CHDL in A. baumannii in China. However, the current data is limited to simple epidemiological distribution [16,17]. In this study, we detailed characterized the genetic contexts surrounding blaOXA-58 and the replicon typing of the blaOXA-58-carrying plasmids in Acinetobacter spp. isolates from multiple cities in China. PCR Experiments for the Resistance Genes PCR assays for the presence of carbapenemase encoding genes (blaOXA-51-like, blaOXA-58-like, blaOXA-23-like, blaOXA-40-like, blaOXA-143, blaIMP, blaVIM, blaSIM and blaNDM) and ESBL genes (blaPER and blaSHV) were performed as previously reported [19– 21]. Pulsed-field Gel Electrophoresis and Multilocus Sequence Typing Analysis The genetic relationship of the isolates was evaluated by pulsedfield gel electrophoresis (PFGE) and multilocus sequence typing (MLST). The results of PFGE were interpreted as Tenover et al. recommended [22]. MLST was carried out using the scheme developed by Bartual et al. with some modifications to the primers of the alleles of gyrB and rpoD as we previously reported [23,24]. Materials and Methods Bacterial Strains and Antimicrobial Susceptibility Testing Plasmid Conjugation and Electrotransformation Twelve non-duplicated blaOXA-58-harboring Acinetobacter spp. isolates collected from six hospitals in five different cities in China between 2005 and 2010 were analyzed in this study (Table 1). The genomic species identification was performed by sequence analysis of the 16S-23S rRNA intergenic spacer region [18]. Imipenem and ticarcillin-susceptible clinical A. baumannii strain LS0148 (imipenem MIC, 0.5 mg/L; ticarcillin MIC, 16 mg/L), deposited in our laboratory, was used as the recipient for plasmid electrotransformation (Table 1). A colistin-resistant mutant strain of A. baumannii LS0148 (colistin MIC, 64 mg/L) was used as the recipient for plasmid conjugation. MICs were determined by the agar dilution method. Interpretation of the results was in accordance with the CLSI 2013 criteria. All isolates present in this study were stored in the Department of Microbiology, the First Affiliated Hospital, College of Medicine, Zhejiang University. We obtained an exempt status from the Institutional Review Board of the First Affiliated Hospital, College of Medicine, Zhejiang University to use these strains to perform all experiments in this study. Plasmid conjugations were performed between OXA-58 producing Acinetobacter spp. as donors and a colistin-resistant mutant strain of A. baumannii LS0148 as the recipient. The transconjugants were selected on MH agar plates containing ticarcillin (100 mg/L) and colistin (10 mg/L). The electrical pulse setting of plasmid electrotransformation was 1.8 kV, 25 mF, 200 V with Bio-Rad GenePulser Xcell system (BioRad, Shanghai, China). A. baumannii strain LS0148 was used as the recipient. The transformants were selected on MH agar plates containing ticarcillin (100 mg/L). S1 Nuclease-based Plasmid Analysis The plasmid size and the location of blaOXA-58 were analyzed using the S1 nuclease-PFGE method as previously reported [25]. The bacterial-imbedded gel slices were incubated with 10 U S1 nuclease (Takara, Dalian, China) for 40 minutes in 37uC water bath. The digestion products were separated by PFGE using BioRad CHEF Mapper XA system (Bio-Rad, Shanghai, China) with switch times of 2.16S to 63.8S for 18 hours. Table 1. Basic information, epidemiological features and resistant genes of Acinetobacter spp. included in this studya. Strain Species Hospital (Cities) Year PFGE type ST allelic profilesb blaOXA genes ESBL genes AP04 A. pittii HZ (Hangzhou) 2009 A ND – blaOXA-58 Neg AP25 A. pittii TZ (Taizhou) 2009 A ND – blaOXA-58 Neg AN113 A. nosocomialis WZ (Wenzhou) 2009 B ND – blaOXA-58 Neg AN116 A. nosocomialis WZ (Wenzhou) 2009 B ND – blaOXA-58 Neg AN119 A. nosocomialis WZ (Wenzhou) 2009 C ND – blaOXA-58 Neg WA3 A. baumannii WHC (Wuhan) 2008 E 363 51-54-49-11-48-25-4 blaOXA-58, blaOXA-51 blaPER-1 WA8 A. baumannii WHC (Wuhan) 2008 E 363 51-54-49-11-48-25-4 blaOXA-58, blaOXA-51 blaPER-1 WH8144 A. baumannii WH (Wuhan) 2010 D 91 22-15-13-12-4-62-2 blaOXA-58, blaOXA-23, blaOXA-51 Neg JH01 A. baumannii JH (Jinhua) 2005 D 91 22-15-13-12-4-62-2 blaOXA-58, blaOXA-23, blaOXA-51 Neg JH02 A. baumannii JH (Jinhua) 2005 D 91 22-15-13-12-4-62-2 blaOXA-58, blaOXA-23, blaOXA-51 Neg AB212 A. baumannii JH (Jinhua) 2009 D 91 22-15-13-12-4-62-2 blaOXA-58, blaOXA-23, blaOXA-51 Neg AB222 A. baumannii JH (Jinhua) 2009 D 91 22-15-13-12-4-62-2 blaOXA-58, blaOXA-23, blaOXA-51 Neg LS0148 A. baumannii LS (Lishui) 2005 ND 20 1-15-13-12-4-12-2 blaOXA-51 Neg a Abbreviations: HZ, Hangzhou First hospital; TZ, Taizhou Hospital; WZ, The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College; WHC, Wuhan Children Hospital; WH, Wuhan Tongji Hospital; JH, Jinhua Center Hospital; LS, Lishui People Hospital; ND: not defined; Neg: negative; Pos: positive. Seven loci in the order of gltA-gyrB-gdhB-recA-cpn60-gpi-rpoD. doi:10.1371/journal.pone.0084680.t001 b PLOS ONE | www.plosone.org 2 January 2014 | Volume 9 | Issue 1 | e84680 OXA-58-Producing Acinetobacter spp. in China another CHDL gene blaOXA-23. blaPER-1 was detected in WA3 and WA8 (Table 1). The separated DNA was transferred to a positive charged Nylon membrane (Millipore, Shanghai, China) and hybridized with a digoxigenin-labled blaOXA-58 probe. The detection of hybrids was performed using enzyme immunoassay and NBT/BCIP coloration according to the manufacturer’s instruction (Roche, Shanghai, China). The Plasmid Localization of blaOXA-58 The blaOXA-58-probe hybridized with plasmid bands of different sizes, from ca. 52 kb to 143 kb. Isolates with same pulsotypes generally possessed same plasmid location of blaOXA-58, except AP04 and AP25 (Table 2). PCR-based Plasmid Replicon Typing The plasmid replicase genes were detected by multiplex PCR scheme developed by Bertini et al [26]. The novel replicase gene repAci10 was detected by a single PCR with primers designed in this study (Forward primer: 59-TAGGACGTCAAGCATCTTA39; backward primer: 59-TCGCTATCAAGAAGATCAC-39). The Transferability of blaOXA-58-carrying Plasmids While plasmid conjugation ultimately failed, blaOXA-58-carrying plasmids were successfully electro-transferred from all Acinetobacter spp. isolates to the recipient strain. PCR detection of transformants found blaPER-1 and blaOXA-23 were not co-transferred with blaOXA-58, suggesting these genes are not colocalized on a single plasmid. The results of antimicrobial susceptibility testing are presented in Table 2. Electrotransformation of blaOXA-58-harboring plasmids into recipient strain LS0148 resulted in high resistance to ticarcillin (.256 mg/L) and increased MICs of imipenem and meropenem (2 to 32 folds), but transformants retained similar MICs of cefepime, ceftazidime and cefotaxime when compared with that of the original LS0148 strain. The transformants of A. nosocomialis AN119 and all A. baumannii displayed higher MICs of imipenem and meropenem than transformants of A. pittii isolates and remaining A. nosocomialis isolates. Transformants TWH8144, TJH01, TAB212 also showed gentamicin and amikacin resistance, implying potential aminoglycosides resistant determinants are colocalized with blaOXA-58 on the same plasmid. Cloning Experiments The genetic contexts of blaOXA-58 were determined by cloning and sequencing experiments. The plasmids or total DNA were digested by EcoRI or SacI. The digested fragments were inserted into corresponding sites of pET28a, and the ligation mixture was used for transformation. Transformants were selected on MH agar containing ampicillin 50 mg/L and kanamycin 50 mg/L. The blaOXA-58-containing inserts were fully or partially sequenced to obtain the context of blaOXA-58. Nucleotide Sequence Accession Numbers The novel insertion sequence ISAba20 has been submitted to the IS Finder Database (http://www-is.biotoul.fr/). The nucleotide sequences surrounding blaOXA-58 of AN119, AP04, WA3 and WH8144 are deposited in the GenBank database under accession no. JQ241789 to JQ241792 respectively. Identification a Novel Plasmid Replicase Gene Results Further investigation of the blaOXA-58-containing clone fragment of strain WA3 identified a novel plasmid replication protein gene (Figure. 1). This replication protein belonged to Rep-3 superfamily group. It shared similarity with two replication proteins deposited in GenBank database: Acinetobacter sp. RUH2624 (ZP_05826577; 100% amino acid identity) and A. radioresistens SH164 (ZP_06073941; 73% amino acid identity). We have designated this novel replicase gene as repAci10 herein. Of the available A. baumannii replicase genes in the current replicon typing scheme [26], repAci5 was most similar to repAci10 (66% nucleotide identity). Therefore, repAci10 should be assigned as a novel homolog group (GR20). No iteron was identified upstream of repAci10. Using the current PCR-based replicon typing scheme of A. baumannii [26], only GR8 was detected in strain JH01 and JH02 from the 12 OXA-58 producing Acinetobacter spp. (Table 2). GR3 and GR7 are the intrinsic plasmid rep genes of recipient strain LS0148. No other replicase genes were detected in the transformants except for the intrinsic plasmid replicase genes of LS0148 (GR3 and GR7), suggesting the blaOXA-58-carrying plasmids do not belong to any previously known replicon group. The novel replicase gene repAci10 was detected in A. pittii (AP04, AP25), A. nosocomialis (AN113, AN116 and AN119), A. baumannii (WA3, WA8) and their transformants (Table 2). Species Identification and Antimicrobial Susceptibility Profiles The 12 OXA-58-producing Acinetobacter spp. isolates were assigned to three genomic species: A. baumannii (seven isolates), A. nosocomialis (three isolates) and A. pittii (two isolates), and showed various resistance profiles (Table 1 and 2). The five non-baumanii Acinetobacter displayed imipenem and meropenem susceptible. On the contrary, all of the A. baumannii isolates were imipenem and meropenem resistance. In general, the A. baumannii isolates were more frequently resistant to broad-spectrum cephalosporins, ampicillin/sulbactam, aminoglycosides, ciprofloxacin and minocycline than the five non-baumanii Acinetobacter. Molecular Epidemiology of the OXA-58-producing Acinetobacter spp. PFGE identified five pulsotypes among the 12 OXA-58producing Acinetobacter spp. isolates (Table. 1). Two A. pittii isolates from different hospitals showed a same pulsotype. Three A. nosocomialis isolates from a single hospital belonged to two pulsotypes. Seven A. baumannii isolates were divided into two pulsotypes, corresponding to two sequence types (ST91 and ST363). A. baumannii ST91 were identified from two hospitals in different cities (Wuhan and Jinhua). Moreover, ST91 were detected in A. baumannii collected from Jinhua Center Hospital in 2005 and 2009, implying probable endemic in this hospital. Genetic Contexts of blaOXA-58 Four kinds of genetic contexts of blaOXA-58 were identified among 12 Acinetobacter spp. (Figure. 1). Structure A included two A. pittii isolates (AP04, AP25) and two A. nosocomialis isolates (AN113 and AN116). Structure B encompassed all A. baumannii ST91 isolates of WH8144, JH01, JH02, AB212 and AB222. Structure C encompassed A. baumannii isolates WA3 and WA8. Structure D Distribution of Resistance Genes The A. pittii and A. nosocomialis were negative for other carbapenemase genes and ESBLs. Intrinsic blaOXA-51 was detected in all A. baumannii isolates. All A. baumannii ST91 isolates carried PLOS ONE | www.plosone.org 3 January 2014 | Volume 9 | Issue 1 | e84680 OXA-58-Producing Acinetobacter spp. in China Table 2. The sizes and replicon types of blaOXA-58-harboring plasmids, genetic contexts of blaOXA-58, and MICs (mg/L) of represented com a ocorrência de raiva e leishmaniose visceral canina. Material e métodos Foram utilizados os resultados do censo canino e felino realizado em 1994 8 e os dados da coleta censitária de sangue para diagnóstico da leishmaniose visceral canina realizada na área urbana do município, entre janeiro e dezembro de 1999 (Centro de Controle de Zoonoses, Secretaria de Saúde e Higiene Pública. Boletins mensais das atividades de controle da leishmaniose visceral. Araçatuba, 1999-2004). Os dados de 2004 também foram obtidos por meio de censo canino realizado pelo Centro de Controle de Zoonoses (CCZ) da Secretaria de Saúde e Higiene Pública do município, no período de novembro de 2003 a março de 2004. Utilizou-se a divisão do município em oito áreas e 36 setores, divisão esta adotada pela Superintendência de Controle de Endemias (SUCEN) desde 1996, como padrão para as ações de saúde 9. Os dados de eutanásia canina foram obtidos dos boletins mensais das atividades de controle da raiva do Município de Araçatuba (Direção Regional de Saúde de Araçatuba, Secretaria de Estado da Saúde de São Paulo. Boletins das atividades de controle da raiva, Município de Araçatuba, 1993 a 2004). Para a comparação entre as faixas etárias da população canina consideraram-se os anos de 1994 e 2004, adotando-se o critério previamente utilizado em 1994 (< 1 ano; de 1 a 4 anos; > 4 anos). Como na coleta censitária de sangue de 1999 não houve registro da idade dos animais, a mesma não foi considerada para análise. Para a análise estatística utilizaram-se os testes do qui-quadrado e de duas proporções, adotando-se o nível de significância de 5% 10. Resultados e discussão A relação cão/habitante na área urbana de Araçatuba variou de 1,69 em 1994 para 2,03 cães em 1999, atingindo 1,79 cães para cada dez habitantes em 2004 (Tabela 1). O aumento observado no período pós-epidemia da raiva (1996 a 1998) reforça as observações de Beran & Frith 1 e Wandeler et al. 3 de que qualquer redução no tamanho da população canina por aumento na mortalidade é rapidamente compensada pelo aumento na reprodução e na taxa de sobrevivência. Quanto à distribuição sexual, houve diferença estatisticamente significante entre os períodos (p < 0,0001) com 56,2% de machos e 43,8% de fêmeas em 1994, passando a 51% e 49%, respectivamente, em 1999 e 49,9% e 50,1% em 2004. Embora na maioria dos estudos observese a predominância de animais do sexo masculino 2, em Araçatuba a predominância de machos observada em 1994 evoluiu para uma similaridade na distribuição entre os sexos, em 2004. As preferências da população que resultam na seleção de cães machos ou fêmeas são variáveis e sofrem influência de vários fatores econômicos e culturais, podendo ter influenciado os resultados observados na presente pesquisa. Observou-se também diferença estatisticamente significante (p < 0,0001) entre os anos de 1994 e 2004 para a distribuição da população canina segundo a faixa etária (Figura 1). A população de cães com até um ano de idade que representava 20,2% dos animais de 1994, passou a 32,5% em 2004 e a população de um a quatro anos de idade que era de 56,6% da população canina de 1994, diminuiu para 39,1% em 2004. Esse tipo de distribuição é típico de países do terceiro mundo e situações semelhantes foram observadas na Nigéria 11 e em Ibiúna, Estado de São Paulo 12. As implicações epidemiológicas dessa predominância de cães jovens incluem maior suscetibilidade a diferentes doenças e Tabela 1 Populações canina e humana na área urbana de Araçatuba, São Paulo, Brasil, e relação entre elas no período de 1994 a 2004. Ano Cães Habitantes Relação habitante/ cão Relação cão/ 10 habitantes * 1994 1999 2004 26.926 34.332 31.793 159.700 169.303 177.823 * Relação seguida de letras diferentes diferem entre si (p < 0,0001). 5,93 4,93 5,59 1,69 c 2,03 a 1,79 b Cad. Saúde Pública, Rio de Janeiro, 24(4):927-932, abr, 2008 ESTUDO DESCRITIVO DE UMA ESTRUTURA POPULACIONAL CANINA 929 Figura 1 Porcentagem de cães segundo a faixa etária na área urbana de Araçatuba, São Paulo, Brasil, nos anos de 1994 e 2004. baixa resposta imunológica frente a diversas vacinas contra importantes enfermidades, como a raiva 2,13. O número de eutanásias realizadas pelo CCZ declinou no período pós-raiva (1997 e 1998) e aumentou a partir de 1999 com a introdução da leishmaniose visceral (Figura 2). A taxa de eutanásia em 1994 foi de 8,8% (2.376/26.926); em 1999 foi de 14,9% (5.121/34.332) e em 2004 de 29,4% (9.364/31.793), diferenças estas estatisticamente significantes (p < 0,0001). Considerando-se o período de 11 anos, 49.380 cães foram submetidos à eutanásia no CCZ, sendo que deste total, 41.774 corresponderam ao período entre 1999 e 2004 (dados não apresentados). Ao contrário da raiva, cujas medidas de controle são amplamente eficazes, a enzootia de leishmaniose visceral no município não conta com meios de prevenção tão eficientes 14,15 e a alta taxa de eutanásia observada pode ter sido fator determinante para o decréscimo da população canina. Segundo Lima Júnior 2, elevadas taxas de mortalidade favorecem a renovação populacional o que pode resultar em população mais jovem e com maior tendência à prolificidade. Em Araçatuba, porém, a eliminação anual de um grande número de cães pode ter prejudicado seriamente o crescimento desta população uma vez que, mesmo havendo a reposição dos cães, muitos podem ter sido eliminados antes de atingirem a idade reprodutiva. A distribuição dos animais pela área urbana de Araçatuba revelou uma densidade de cães variável entre os diversos setores. Em 2004, por exemplo, os cães jovens com menos de dois anos de idade representaram 49,6% dos cães da área urbana (Figura 3). Os setores mais periféricos, com população de poder aquisitivo mais baixo, com mais problemas sociais e de saneamento ambiental, além de animais sem acompanhamento médico-veterinário, apresentaram alto percentual de cães menores de dois anos de idade (62% a 68%). Por outro lado, em setores economicamente mais desenvolvidos (região central), a porcentagem de cães com menos de dois anos de idade variou de 32,7% a 37,7%, sugerindo que a expectativa de vida dos cães destes setores é superior à dos periféricos. Os setores com maior porcentagem de animais jovens também apresentaram maior número de casos humanos de leishmaniose visceral e prevalência canina da doença (Centro de Controle de Zoonoses, Secretaria de Saúde e Higiene Pública. Boletins mensais das atividades de controle da leishmaniose visceral. Araçatuba, 1999-2004). Tal resultado é influenciado pela maior freqüência de ações de controle desenvolvidas nesses locais em decorrência dos casos humanos, resultando em maior taxa de eutanásia. Porém, o aumento da população canina mais jovem pode resultar em aumento da susceptibilidade destes cães à leishmaniose visceral, mantendo a doença na área. Cad. Saúde Pública, Rio de Janeiro, 24(4):927-932, abr, 2008 930 Andrade AM et al. Figura 2 Número de cães eutanasiados e existentes no período de 1994 a 2004 na área urbana de Araçatuba, São Paulo, Brasil. Figura 3 Porcentagem de animais de até dois anos de idade nos diferentes setores do Município de Araçatuba, São Paulo, Brasil, em 2004. São Paulo Cad. Saúde Pública, Rio de Janeiro, 24(4):927-932, abr, 2008 33% a 38% 38% a 46% 46% a 54% 54% a 62% 62% a 68% ESTUDO DESCRITIVO DE UMA ESTRUTURA POPULACIONAL CANINA 931 Conclui-se que a ocorrência de raiva e leishmaniose visceral influenciou na estrutura e composição da população canina da área urbana de Araçatuba, em decorrência das ações de controle aplicadas ao reservatório canino. Resumo Colaboradores No período de 1994 a 2004, a população canina de Araçatuba, São Paulo, Brasil, registrou duas importantes zoonoses: a raiva e a leishmaniose visceral. Analisaram-se as mudanças ocorridas nessa população durante esse período, utilizando resultados de censos caninos e de coletas censitárias de sangue realizados em 1994, 1999 e 2004. A relação cão/10 habitantes variou significativamente, passando de 1,7 em 1994 para 2,0 em 1999 e para 1,8 em 2004. A porcentagem de cães com até um ano de idade passou de 20% para 32,5% e o número de eutanásias realizadas também aumentou após 1999, com a introdução da leishmaniose visceral. O número de cães e a estrutura etária variaram nos diversos setores do município e aqueles com maior porcentagem de animais com até dois anos de idade apresentaram maior ocorrência de casos de leishmaniose visceral humana e canina. Tais resultados decorrem de ações de controle adotadas nos setores com casos humanos de leishmaniose visceral, porém, o aumento da população canina mais jovem pode resultar em aumento da susceptibilidade destes cães à doença, favorecendo a manutenção da mesma na área. A. M. Andrade contribuiu na coleta de dados, análise e interpretação dos resultados e elaboração do manuscrito. S. H. V. Perri colaborou na análise maior foco. No Brasil e no mundo os dados epidemiológicos demonstram que a epidemia avançou acometendo grupos sociais mais vulneráveis, estando os idosos entre estes 1,2. A expansão da AIDS, apesar das campanhas preventivas, é apontada em pesquisas como consequência de mudanças comportamentais impulsionadas pelo fenômeno da globalização, da massificação da notícia e da relativização de valores 5,6. É dito, ainda, que o aumento da infecção em idosos se deve a não assimilação/ adoção por parte desta população das medidas para o sexo seguro. Atualmente, medicamentos Cad. Saúde Pública, Rio de Janeiro, 29(10):2131-2135, out, 2013 CARACTERIZAÇÃO EPIDEMIOLÓGICA DOS CASOS DE AIDS 2133 Tabela 1 Distribuição dos casos de AIDS em pessoas com 60 anos ou mais, segundo as Gerências Regionais de Saúde (GERES) de Pernambuco, Brasil, 1998 a 2008. GERES 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 Total % I 12 11 9 15 21 15 20 27 18 15 20 183 62,5 II 0 0 0 0 0 1 0 0 1 0 0 2 0,7 III 0 1 1 0 0 0 0 0 1 0 0 3 1,0 IV 0 1 1 0 3 1 0 3 2 4 2 17 5,8 V 0 0 0 1 1 0 0 0 1 0 0 3 1,0 VI 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 1 0,3 VII 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 1 0,3 VIII 0 1 0 0 0 0 0 0 1 0 1 3 1,0 IX 0 0 0 0 1 0 0 0 1 0 0 2 0,7 X 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0,3 XI 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0,0 Pernambuco 12 14 12 16 26 17 20 32 25 19 23 216 73,7 Ignorado 0 0 9 8 10 7 7 2 15 19 0 77 26,3 Total 12 14 21 24 36 24 27 34 40 38 23 293 100,0 Fonte: Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN), 2010. Figura 1 Incidência dos casos de AIDS por 100 mil habitantes em pessoas com 60 anos ou mais, segundo ano de diagnóstico. Pernambuco, Brasil, 1998 a 2008. Fonte: Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN), 2010. que inibem a impotência sexual e a reposição hormonal fazem com que os idosos passem a ter uma vida sexual mais ativa, não utilizando, contudo, medidas preventivas por não se sentirem vulneráveis 6. Pesquisas brasileiras constatam o aumento de casos de AIDS em pessoas com menor escolaridade 7,8,9,10,11, ficando esta condição demonstrada neste estudo. A via heterossexual foi a categoria de maior expressão, reforçando que a prática sexual, sem proteção, constitui a mais importante via de transmissão também entre os idosos, denotando a necessidade de abordagens para o sexo seguro também para esta faixa etária. Chama a atenção o fato de não ter havido nenhum caso de UDI entre os idosos deste trabalho. Possivelmente, assumindo erroneamente que es- Cad. Saúde Pública, Rio de Janeiro, 29(10):2131-2135, out, 2013 2134 Silva MM et al. Tabela 2 Distribuição dos casos de AIDS em pessoas com 60 anos ou mais, segundo sexo, anos de estudos e categoria de exposição. Pernambuco, Brasil, 1998 a 2008. Variáveis 60-69 n% Faixa etária (anos) 70-79 80 e mais n%n% Sexo Masculino 159 54,2 33 11,3 Feminino 74 25,3 18 6,2 Anos de estudos Nenhum 19 6,4 3 1,0 1-3 38 13,0 6 2,1 4-7 28 9,5 7 2,4 8-11 21 7,1 2 0,7 12 e mais 20 6,8 3 1,0 Ignorado 107 36,5 30 10,2 Categoria de exposição Homossexual 15 5,1 3 1,0 Bissexual 10 3,4 2 0,7 Heterossexual 108 36,9 19 6,5 UDI 0 0,0 0 0,0 Ignorado 100 34,2 27 9,2 Total 233 79,5 51 17,4 UDI: usuários de drogas injetáveis. Fonte: Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN), 2010 3 6 1 1 2 0 1 4 2 0 4 0 3 9 1,0 2,0 0,3 0,3 0,7 0,0 0,3 1,4 0,7 0,0 1,4 0,0 1,0 3,1 Total n% 195 66,5 98 33,5 23 7,8 45 15,4 37 12,6 23 7,8 24 8,2 141 48,1 20 6,8 12 4,1 131 44,7 0 0,0 130 44,4 293 100,0 se grupo não é passível de tal comportamento, os profissionais de saúde não tenham investigado essa prática (no presente ou no passado) nessa população, embora seja essa abordagem um fator importante na investigação epidemiológica do caso 10,11. A ausência de casos em alguns anos deste estudo pode refletir a falta de diagnóstico, a subnotificação, atraso na investigação, denotando, todavia, baixa qualidade da informação coletada, sendo este um dos principais problemas da vigilância epidemiológica 12. Considerações finais O envelhecimento para ser experiência positiva exige independência e qualidade de vida, concebendo o exercício da sexualidade como natural e, portanto, inerente a essa população. A incidência de AIDS na população estudada faz supor que as campanhas de prevenção sobre HIV/AIDS e outras DST, até então realizadas, não estão atingindo eficazmente essa população. Faz-se necessário que campanhas específicas sejam pensadas e que os serviços de saúde abordem essa temática durante as consultas de rotina em atendimento aos idosos, possibilitando a prevenção primária. Para isso, é preciso capacitar profissionais, não só os envolvidos com a vigilância epidemiológica, mas, especificamente, os que assistem aos pacientes, para que atentem sobre a importância da informação. A confiabilidade, completude e atualização dos dados de notificação melhoram a qualidade e privilegiarão as tomadas de decisões. Cad. Saúde Pública, Rio de Janeiro, 29(10):2131-2135, out, 2013 CARACTERIZAÇÃO EPIDEMIOLÓGICA DOS CASOS DE AIDS 2135 Resumen Colaboradores Se están produciendo cambios en el escenario mundial durante los últimos años, debido a la reducción de las tasas de fecundidad y mortalidad, y como resultado, la longevidad se presenta como un fenómeno real. Durante la madurez, la sexualidad viene asociada a prejuicios más diversos. Este estudio caracteriza los casos de SIDA en personas de 60 años o más que vivían en el estado de Pernambuco, Brasil, y que se notificaron al Departamento de Salud de Pernambuco entre el 1 enero 1998 al 31 diciembre 2008. Se realizó un estudio transversal/ datos descriptivos con información del Sistema de Notificación de Resultados. En 1998, la tasa de incidencia del SIDA en la población estudiada fue de 1,6 casos por cada 100 mil habitantes, elevándose a 4,8 casos/100 mil habitantes en 2008, con un incremento del 200%. Es evidente la necesidad de desarrollo de la prevención, el diagnóstico y la asistencia dirigida específicamente a las personas mayores, ya que la sexualidad esa etapa de la vida, sigue rodeada de muchos tabúes y mitos. M. M. Silva, A. L. R. Vasconcelos e L. K. N. P. Ribeiro contribuíram na concepção do desenho, análise e interpretação dos dados, redação do artigo, e elaboraram e fizeram todas as correções necessárias até a aprovação da versão final. Agradecimentos Agradecemos ao Departamento de Saúde Coletiva, Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães, Fundação Oswaldo Cruz e ao Núcleo de Epidemiologia da Secretaria Estadual de Saúde de Pernambuco, pelo incentivo à pesquisa e ao fornecimento de dados. VIH; Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida; Envejecimiento de la Población Referências 1. Brito A, Castilho E, Szwarcwald C. AIDS e infecção pelo HIV no Brasil: uma epidemia multifacetada. Rev Soc Bras Med Trop 2001; 34:207-17. 2. Ministério da Saúde. 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Characterization of a novel plasmid type and various genetic contexts of bla OXA-58 in Acinetobacter spp. from multiple cities in China.
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